怎樣調(diào)整培養(yǎng)基的pH才是正確且合理的呢

　　一般來說，選擇性物質(zhì)的存在會縮小它們生長的pH范圍，將培養(yǎng)基的pH調(diào)至預(yù)期的范圍內(nèi)是很重要的。當(dāng)實(shí)驗(yàn)室根據(jù)培養(yǎng)基成分自己配制培養(yǎng)基時，必須檢測并調(diào)整pH。那么怎樣調(diào)整培養(yǎng)基的pH才是正確且合理的呢？

　　測定培養(yǎng)基pH的*準(zhǔn)確的方法是使用pH計(jì)，使用前必須用已知pH的（通常pH為4-7）標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液進(jìn)行校準(zhǔn)。將pH計(jì)的電極用蒸餾水沖洗后浸入到燒杯的培養(yǎng)基中，就可以從pH計(jì)的刻度讀出培養(yǎng)基的pH。每個生產(chǎn)廠商對每種不同pH計(jì)都提供有詳細(xì)的操作說明。

　　配制培養(yǎng)基時，使用帶機(jī)械攪拌的pH計(jì)可以很容易地調(diào)整pH。

　　培養(yǎng)基位在能夠不停攪拌的容器（如大燒杯）中配制，使用磁力攪拌器，磁力攪拌器帶有聚乙烯或聚四氟乙烯包裝的磁棒。含瓊脂的培養(yǎng)基需在融化后調(diào)整其pH，用可加熱的磁力攪拌器很容易辦到。調(diào)節(jié)pH時用已知pH的標(biāo)準(zhǔn)緩沖液溶液先對pH計(jì)進(jìn)行校準(zhǔn)。然后將復(fù)合電極和電阻溫度計(jì)（如果有）置于培養(yǎng)基，從燒杯遠(yuǎn)離電極的一端緩慢加人適量的鹽酸和氫氧化鈉，保到培養(yǎng)基達(dá)到并保持所需的pH。

　　pH計(jì)的溫度補(bǔ)償應(yīng)考慮到溫度對電極系統(tǒng)的影響：在一些稀釋液和培養(yǎng)基中，pH隨溫度的變化而有相當(dāng)大的變化。對于液體培養(yǎng)基和稀釋液而言，通常既可以在25℃下，也可以在其使用時的溫度下調(diào)整和測定。

　　瓊脂培養(yǎng)基必須在溶解后進(jìn)行pH的調(diào)整，溶解的溫度在45℃以上。因此，固體培養(yǎng)基應(yīng)在其使用溫度確定pH。這時應(yīng)使用平頭的復(fù)合電極，同時用手動校準(zhǔn)pH計(jì)的溫度補(bǔ)償。在制備培養(yǎng)基時,若測定出培養(yǎng)基在熔化狀態(tài)和凝固狀態(tài)的pH有所不同時，說明在調(diào)整pH產(chǎn)生誤差。

　　同樣，制備的培養(yǎng)基在加熱滅菌處理（如高壓滅菌>時，也可能會產(chǎn)生pH的變化。對于脫水培養(yǎng)基，生產(chǎn)廠商己考慮到這一點(diǎn)，通常不謠要再調(diào)整其pH。但應(yīng)認(rèn)真核對待用培養(yǎng)基的pH。如果脫水的瓊脂培養(yǎng)基在再次溶解或制備的過程中必須調(diào)整pH，那么在滅菌操作步驟之后用過濾滅菌的鹽酸和氫氧化鈉溶液進(jìn)行調(diào)整，以避免造成因再次滅菌而形成的培養(yǎng)基的過度加熱。當(dāng)用不同的原枓或藥品制備培養(yǎng)基時，必須在高壓滅菌后檢測培養(yǎng)基的pH。此外，如果發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基的在每次高壓滅菌后都發(fā)生相同變化，可在配制培養(yǎng)基時對pH進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整。但仍需測定培養(yǎng)基滅菌后的*終pH。