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    怎樣調整培養基的pH才是正確且合理的呢

    更新時間:2022-04-21   點擊次數:1894次
      一般來說,選擇性物質的存在會縮小它們生長的pH范圍,將培養基的pH調至預期的范圍內是很重要的。當實驗室根據培養基成分自己配制培養基時,必須檢測并調整pH。那么怎樣調整培養基的pH才是正確且合理的呢?
      測定培養基pH的*準確的方法是使用pH計,使用前必須用已知pH的(通常pH為4-7)標準緩沖溶液進行校準。將pH計的電極用蒸餾水沖洗后浸入到燒杯的培養基中,就可以從pH計的刻度讀出培養基的pH。每個生產廠商對每種不同pH計都提供有詳細的操作說明。
      配制培養基時,使用帶機械攪拌的pH計可以很容易地調整pH。
      培養基位在能夠不停攪拌的容器(如大燒杯)中配制,使用磁力攪拌器,磁力攪拌器帶有聚乙烯或聚四氟乙烯包裝的磁棒。含瓊脂的培養基需在融化后調整其pH,用可加熱的磁力攪拌器很容易辦到。調節pH時用已知pH的標準緩沖液溶液先對pH計進行校準。然后將復合電極和電阻溫度計(如果有)置于培養基,從燒杯遠離電極的一端緩慢加人適量的鹽酸和*,保到培養基達到并保持所需的pH。
      pH計的溫度補償應考慮到溫度對電極系統的影響:在一些稀釋液和培養基中,pH隨溫度的變化而有相當大的變化。對于液體培養基和稀釋液而言,通常既可以在25℃下,也可以在其使用時的溫度下調整和測定。
      瓊脂培養基必須在溶解后進行pH的調整,溶解的溫度在45℃以上。因此,固體培養基應在其使用溫度確定pH。這時應使用平頭的復合電極,同時用手動校準pH計的溫度補償。在制備培養基時,若測定出培養基在熔化狀態和凝固狀態的pH有所不同時,說明在調整pH產生誤差。
      同樣,制備的培養基在加熱滅菌處理(如高壓滅菌>時,也可能會產生pH的變化。對于脫水培養基,生產廠商己考慮到這一點,通常不謠要再調整其pH。但應認真核對待用培養基的pH。如果脫水的瓊脂培養基在再次溶解或制備的過程中必須調整pH,那么在滅菌操作步驟之后用過濾滅菌的鹽酸和*溶液進行調整,以避免造成因再次滅菌而形成的培養基的過度加熱。當用不同的原枓或藥品制備培養基時,必須在高壓滅菌后檢測培養基的pH。此外,如果發現培養基的在每次高壓滅菌后都發生相同變化,可在配制培養基時對pH進行適當調整。但仍需測定培養基滅菌后的*終pH。




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